操妹子视频 I 性欧美xxxx16少妇 I 深夜福利免费观看 I 久操资源 I 欧美性生交 I 欧美亚洲综合色 I 新影音先锋男人色资源网 I 在线看你懂得 I 91精品啪啪 I 91日日 I 少妇女优 I 国产调教视频在线观看 I 精品久久久噜噜噜噜久久图片 I 国外黄色片 I 亚洲成无码人在线观看 I 天天草天天射 I 91精品国产综合久久精品麻豆 I 学生调教贱奴丨vk I h片在线免费观看视频 I 久久精品国产电影 I 亚洲欧美人成视频一区在线 I chinese上海videos麻豆 I 美日韩一二三区 I 国产二区免费 I 久久久久久久免费精品 I 国产精品成人网址在线观看 I 俄罗斯乱妇 I 欧洲亚洲1卡二卡三卡2021 I 波多野结衣黄 I 日本特黄特色特爽大片 I 99裸体 I 爱爱发综合网 I 免费看成人 I 色婷婷激情四射 I 男女无遮挡激情视频 I 蜜桃传媒一区 I 亚洲色图综合区 I 久久亚 I 无码综合天天久久综合网色吧影院 I 印度黄色片 I 国产精一区二区 I 国产精品精品 I 国产理论三级 I 亚洲精品1区 I 白胡子影院 I 国产精品自在在线午夜 I 极品无码人妻巨屁股系列 I 久久婷婷五月综合色99啪 I 成人无码一区二区三区网站 I 朝鲜大乳女奶水奶水吃奶 I 神马午夜电影网 I 亚洲欧洲午夜 I 97国产人人 I 久久精品女人18毛片水多国产 I 国产老女人乱淫免费 I 亚洲三级在线播放 I 人人干国产 I 日本女人性视频 I 内衣办公室第一集 I 欧美另类专区 I 亚洲一级片免费 I 97夜夜澡人人双人人人喊 I 小辣椒福利视频精品导航

　　 ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出準確的結果。
首先的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA試劑盒所以ELISA試劑盒的購買，試劑質量的保證以及實驗前實驗儀器的檢察都是很有重要性的。

1、加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。　　加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。
2、標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫入x心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。

3、試劑的準備
按Elisa試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA試劑盒ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

4、保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。
ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時，產物的生成可達。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予采用。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA板放在濕紗布上。
5、濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，ELISA試劑盒特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內，標準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA板只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。