ELISA法多年來廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實驗室中，相對于其它檢測方法，ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好的特點，并具有操作簡便、無放射性危害的優(yōu)點，但是在一些測定實驗中，結(jié)果會出現(xiàn)誤差影響測定結(jié)果。這篇文章總結(jié)了很多的實驗經(jīng)驗從幾個方面分析影響結(jié)果的因素。
1 ELISA試劑盒
（1）抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價降低或失活，結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高，對雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高，實驗中空白對照OD值偏高或假陽性。
（2）酶結(jié)合物濃度過高，也會導(dǎo)致OD值假性增高。
2 試驗儀器
（1）加樣器是否經(jīng)過校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的性能不好，吸取樣品不，會使結(jié)果忽高忽低。
（2）每次洗板前，應(yīng)檢查洗板機針孔有無堵塞。
3 實驗操作
（1）檢測前先將ELISA試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，以免造成試驗結(jié)果假性降低。
（2）加樣時注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
（3）洗滌不充分，會使結(jié)果假性增高，過分洗滌呈假陰性。
（4）比色時應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高。
（5）抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡，依賴于溫度與時間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落，溫度低于4℃，影響反應(yīng)速度。
ELISA實驗的影響因素較多，這就更為嚴(yán)格的要求我們在實驗過程當(dāng)中要遵守操作規(guī)范，做到細(xì)致嚴(yán)謹(jǐn)，zui大限度或是杜絕各種因素的影響，從而得到準(zhǔn)確無誤的測定結(jié)果，更好的服務(wù)于我們的科研工作。
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