很多時候客戶在訂購ELISA試劑盒時會問到一些問題，影響ELISA試劑盒測定結果有哪些原因呢？讓我司錢與您一起來討論：
ELISA試劑盒方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定，具有靈敏度高，操作簡單等優(yōu)點，但是在具體實驗過程中影響因素較多，并且要按照嚴格的說明要求，在臨床檢驗中除正常反應外，有時常可見到一些錯誤結果（即假陽性或假陰性結果）。
影響ELISA測定錯誤結果的原因主要有：①標本因素；②試劑因素；③操作因素。本文就標本因素對ELISA測定的影響做如下討論。
（1）類風濕因子
人血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結合，從而導致假陽性。ELISA試劑盒解決該情況的辦法是：①用F（ab）2替代完整的IgG；②標本用聯(lián)有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效）；③檢測抗原時，可以用2-巰基乙醇等加入到標本稀釋液中，使RF降解。
（2）補體
ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標記二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構，其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來，使C1q 可以將二者連接起來，從而造成假陽性。解決的辦法是：①用EDTA稀釋標本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。
（3）嗜異性抗體
人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig （s） 結合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來，也能造成假陽性。解決的辦法是：可在標本稀釋液中加入過量的動物Ig （s） ，但加入量不足或亞類不同時無效。
（4）嗜靶抗原的自身抗體
抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體，有時能與靶抗原結合形成復合物，在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定結果。為避免以上情況出現(xiàn)，解決的辦法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定。
（5）醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig （s） 抗體
臨床開展的用鼠源性CD3等單克隆抗體治療，用放射性同位素標記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術，均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體；另外，被鼠等嚙齒類動物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠Ig （s） 抗體。這些病人ELISA測定時均可產(chǎn)生假陽性。解決的辦法是：測定抗原時，在標本中加入足量的正常鼠Ig （s） ，從而克服由于上述原因造成的假陽性。
（6）交叉反應物質(zhì)
類AFP樣物質(zhì)等，是與靶抗原有交叉反應的物質(zhì)。在用多抗測定抗原時對測定結果影響不大，但在用單克隆抗體測定抗原時，如果交叉抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對應的靶決定簇時，也會出現(xiàn)假陽性結果。
（7）標本中其它成分的影響 血清脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，ELISA檢測試劑盒均對ELISA測定結果有干擾作用。
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室
主營產(chǎn)品：酶聯(lián)免疫試劑盒，食品農(nóng)殘檢測，細胞系，培養(yǎng)基，胎牛血清
©2019 版權所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號：滬ICP備14033764號-3 總訪問量：1287621 站點地圖 技術支持：環(huán)保在線 管理登陸