簡單介紹在ELISA實驗中對不同類型樣本的處理方法，ELISA實驗中正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的第一步。
1、血漿
ELISA實驗用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本，標本采集后30min內4℃1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融，避免使用溶血或高血脂的標本。
2、 細胞培養上清
取細胞培養上清到離心管，1000×g離心20min，除去細胞碎片及雜質取上清。(-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。)
3、 細胞裂解液
(1)吸去培養板內的培養基，用yi酶消化細胞，加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。(懸浮細胞可省略)
(2)收集細胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養基，用預冷的PBS潤洗3次。
(3)加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
(4)將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復凍融幾次，使細胞充分裂解。
(5)4℃10000×g離心10min，除去細胞碎片取上清。(-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。)
4、 血清
血清是常用于ELISA檢測的一類樣本，處理比較簡單。用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃一晚上，使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清大程度的析出)。建議將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
小結： ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量，故應保證所有樣本均為澄清的液體，沉淀或懸浮物都應離心去除。為保證檢測的準確性，保存于-20℃或-80℃的樣本盡量在1~6個月內進行檢測；4℃保存的樣本應在1周內進行檢測。(保證樣本不含NaN3，NaN3會抑制HRP的活性，從而導致假陰性的結果。)
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室
主營產品：酶聯免疫試劑盒，農殘檢測試劑盒，生化試劑盒，PCR試劑盒，細胞，抗原/抗體，胎牛血清等科研實驗產品。
©2019 版權所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號：滬ICP備14033764號-3 總訪問量：1357474 站點地圖 技術支持：環保在線 管理登陸