用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品、HRP標記的親和素，經(jīng)過洗滌后大鼠elisa試劑盒用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
大鼠elisa試劑盒標本的采集及保存：
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本大鼠elisa試劑盒采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4.樣本處理：血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍。
注：以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月，-80℃不應(yīng)超過2個月；標本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
ELISA試劑盒操作注意事項：
1、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應(yīng)充分大鼠elisa試劑盒拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7、底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作
好了以上是大鼠elisa試劑盒采集及保存方法.上海通蔚生物科技有限公司將進一步加強人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新，持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟爭力，實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化大集團企業(yè)，更好、更快捷、更*的服務(wù)于生命科學領(lǐng)域，迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。
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